2024年3月,临床与实验病理学杂志发表了最新的《微卫星不稳定性(MSI)检测技术专家共识》,共识中明确提出:
采用免疫组化法检测肿瘤样本中MLH1、MSH2、MSH6和PMS2表达,若4个MMR蛋白均阳性,则为错配修复功能完整(mismatchrepairproficient,pMMR);任一MMR蛋白缺失即为dMMR。通常dMMR相当于MHI-H表型,pMMR相当于MSI-L/MSS表型,根据免疫组化检测结果可提示是否进行特定MMR基因的突变检测。
1997年,美国国家癌症研究所(NCI)在MSI研讨会对MSI检测位点的选择和诊断标准进行规范和统一,推荐了简称为“2B3D”的MSI位点检测Panel,同时,专家组也制定了Panel判读标准:
1.MSS:
Microsatellite Stability,微卫星稳定性,即微卫星不发生突变。
2.MSI-L:
Low-frequency MSI,低频微卫星不稳定性,即患者微卫星突变检测出的频率低。
3.MSI-H:
High-frequency MSI,高频微卫星不稳定性,即患者微卫星突变检测出的频率高。
1. 微卫星介绍
微卫星是细胞基因组中核苷酸的短串联重复序列,以1-6个碱基为单位,例如CCCCCC。
微卫星不稳定(MSI)就是微卫星中错误插入或缺失,不能被修复,造成微卫星串联长度发生改变。
一般情况下,细胞在复制DNA的过程中,被复制出来的子链应该和模板完全相同,就像我们用电脑复制文本用的Ctrl+C。但有些情况下DNA复制会出错,复制出来的子链和模板链不完全一样,就像我们抄书时多抄或少抄了几个字。这样就会导致细胞和细胞之间微卫星被重复的次数以及包含微卫星的DNA长度发生了改变(如下图所示)。
微卫星不稳定的形成
DNA错配修复蛋白(DNA mismatch repair,MMR)包含MLH1、MSH2、MSH6和PMS2四个蛋白质,能够修复DNA在复制过程中所产生的这类错误。所以,MMR蛋白功能缺失是因,微卫星不稳定是果。
错配修复蛋白修复机制
微卫星不稳定与肿瘤的发生密切相关,并在一定程度上指导临床治疗以及预后评估,因此对其进行检测就显得尤为重要。
MLH1 表达正常的结肠腺癌组织MLH1的最佳染色反应:几乎所有的肿瘤细胞都表现出中度到强烈的核染色反应,未见背景染色,间质细胞可见明显的核染色反应。
MLH1表达缺失的结肠腺癌MLH1最佳染色:肿瘤细胞为阴性,而淋巴细胞和间质细胞作为内部的阳性组织控制表现出明显的核染色反应。
2. 金迪安®微卫星四项抗体试剂(免疫组织化学)
MSH2抗体试剂(免疫组织化学)
MSH6抗体试剂(免疫组织化学)
MLH1抗体试剂(免疫组织化学)
PMS2抗体试剂(免疫组织化学)
3. 金迪安®免疫组化染色仪
DH-4800 PLUS 全自动免疫组化染色仪,可一键完成烤片、脱片、脱蜡、抗原修复直至复染全过程。除常规的免疫组化实验,还支持原位杂交、细胞染色,细、双染、组织双染实验。标准的流程、精密的加样、稳定的环境,帮助实验室获得高质量的染色结果。
迪安生物新推出金迪安® EBER探针(原位杂交法),可在DH-4800 PLUS 仪器上全自动完成高质量实验,提高科室工作效率,增加科室检测项目。