EBV，广泛传播的人类疱疹病毒
EBV是1964 年在伯基特淋巴瘤（Burkitt lymphoma，BL）中发现并分离的一种双链 DNA 病毒，在世界各地绝大多数人都是终身的无症状感染者。根据国际癌症研究署（IARC）致癌因子的分类标准，EBV位列第一组致癌因子。人类是EBV天然宿主之一，其是传染性单核细胞增多症的病原体，也是一种重要的肿瘤相关病毒。
EBV 感染影响人体的免疫反应，主要感染 B 淋巴细胞和上皮细胞，并在淋巴细胞的致癌转化中起致病作用，与多种淋巴瘤的发生、发展有密切联系，如霍奇金淋巴瘤（Hodgkin lymphoma，HL）、弥漫性大 B 细胞淋巴瘤（diffuse large B-cell lymphoma，DLBCL）、原发性中枢神经系统淋巴瘤、移植后淋巴细胞增生性疾病（post-transplant lymphoproliferative disorder，PTLD）、胃癌、伯基特淋巴瘤、结外 NK/T细胞淋巴瘤等。因此，EB 病毒的存在对许多人类癌症的确切影响是一个值得深究的热点问题。
EBV 通常在其生命周期中建立两个阶段，潜伏期和裂解复制期。它主要通过唾液、体液、器官移植和输血等方式在人群之间进行传播，大约95%的成年人有过感染或处于潜伏感染状态。
EBV的感染路径
1. 急性EBV感染
EBV 主要通过唾液传播，进入人体后先感染口咽黏膜上皮细胞，当上皮细胞被感染后，EBV会在细胞内组装产生病毒颗粒，释放到血液中，感染静息状态下的初始B细胞（navie B cell）。被感染的B淋巴细胞会继续产生大量的EB病毒颗粒，继续进入血液循环，从而导致全身性的感染。
2. 慢性EVB感染
EBV 感染人体后诱发的机制可分为两个方面。一方面是病毒引起机体免疫紊乱，活化的 T 淋巴细胞刺激巨噬细胞分泌超量的细胞因子，导致全身炎症反应及淋巴细胞持续的异常活化。另一方面病毒通过潜伏期蛋白激活多条肿瘤信号通路，抑制宿主细胞凋亡，诱导淋巴细胞异常增殖转化，从而导致肿瘤的发生。
EBV相关疾病
EBV潜伏感染被认为是病毒致肿瘤作用的主要机制，根据被感染细胞表面表达的抗原不同，潜伏感染分为４型：
●Ⅰ型 潜伏感染主要见于 Butkitt’s淋巴瘤(BL)；
● Ⅱ型 潜伏感染主要见于鼻咽癌、胃癌、霍奇金淋巴瘤(HL)及NK/T细胞淋巴瘤；
● Ⅲ型 潜伏感染主要见于弥漫性大Ｂ细胞淋巴瘤(DLBCL)及免疫抑制患者的淋巴组织增生性疾病；
● Ⅳ型 潜伏感染仅发生在健康病毒携带者的Ｂ淋巴细胞中。
1. 鼻咽癌
鼻咽癌是发生在鼻咽腔顶部和侧壁的恶性肿瘤，是目前最为明确的与EBV感染相关的人类上皮性肿瘤，其发病率居耳鼻咽喉恶性肿瘤首位，位列中国肿瘤发病率前10位。在中国，鼻咽癌主要发生在广东、广西、福建等中南部沿海地区，且男性阳性率高于女性，中年人为主，少数为年轻人。
鼻咽癌恶性率高，早期可发生颈部淋巴结转移。许多患者在出现明显症状后，已经处于晚期阶段，因此鼻咽癌的早诊早治非常重要。
2. 淋巴瘤
EBV相关淋巴瘤为淋巴细胞发生恶变而致的恶性肿瘤，可发生于 B 淋巴细胞、T 淋巴细胞或NK 细胞，主要包括霍奇金淋巴瘤（Hodgkin lymphoma，HL）和非霍奇金淋巴瘤（non-Hodgkin lymphoma，NHL）。
数据显示，大概近二十年来，总体上我国霍奇金淋巴瘤的发病例数呈增长趋势，大部分初治患者可在接受规范化治疗后治愈，但也存在少部分复发、难治现象。因此，采用更加有效的检测方法对患者而言意义重大。
3. 胃癌
胃癌是人体中最常见、最多发、危害最大的恶性肿瘤之一。研究发现，EB病毒感染是胃癌的主要病因之一，EB病毒相关胃癌（Epstein-Barr virus-associated gastric cancer，EBVaGC）约占所有胃癌的1.3%～30.9%。
2014年，美国癌症基因组图谱研究计划（the Cancer Genome Atlas，TCGA）提出了新的胃癌分子分型，将胃癌肿瘤类型分为 EB病毒（Epstein-Barr virus，EBV）阳性、微卫星不稳定型、基因组稳定型和染色体不稳定型。
4. 炎症性肠病(IBD)
少数情况下IBD患者的肠活检组织中可以检测到较多EBER阳性的淋巴细胞，特别是在溃疡性结肠炎的患者中。此类EBV感染是一种机会性感染，在IBD病程中的作用还不清楚。
什么是“EBER检测”？
目前临床常用的 EB 病毒检测方法包括:
● 外周血EB 病毒 － DNA 定量检测；
● 外周血 EB 病毒抗体检测；
● 免疫组织化学( immunohistochemistry，IHC) 检测；
● EB 病毒编码的小RNA( EB virus encoded small RNA，EBER) 原位杂交( in situ hybridization，ISH) 等方法。
EBER 原位杂交因其敏感性高、特异性强、定位精准等原因成为活检组织中诊断EB病毒感染的金标准，可为肿瘤筛查、诊断、治疗、及预后判断提供可靠的病理学依据。
免疫组化法：
EBV潜伏膜蛋白1（LMP-1）被公认为病毒基因组编码的“具有促细胞癌变和转移作用”的瘤蛋白， LMP-1可通过免疫组化法进行检测，使胞质和胞膜着色，客观表现出被感染细胞中EB的蛋白表达情况。然而，免疫组织化学法仅能检测病毒蛋白质表达阶段，对于细胞内EB低拷贝的检测灵敏性稍差。
原位杂交法：
EBER原位杂交检测技术是公认的EB病毒标准检测方法。对比免疫组化，原位杂交为核酸水平，免疫组化为蛋白水平，抗原抗体反应，杂交更具有特异性。对比非原位方法，EBER原位杂交技术在检测EBV时具有定位作用，能够确定病毒与组织和细胞的关系。
在EBER原位杂交检测中，使用的是寡核酸探针对已知的EBER1和EBER2两个RNA分子进行杂交，用地高辛抗体标记的核苷酸片段按EBER1和EBER2的特定碱基序列进行互补性设计，最后再经过辣根过氧化物酶-酶底物化学显色反应来完成，此过程不仅能实现EBV的检测，亦可提高诊断灵敏度，实现定位准确且特异性强，是公认的EB病毒标准检测方法。
EBER ISH是判断器官组织标本EBV感染的金标准(by:Reviews in medical virology, 2008, 18(5): 305-319.)
金迪安® EBER原位杂交检测
由迪安生物推出的EBER探针(原位杂交法)，搭配金迪安®全自动免疫组化染色仪DH-4800 Plus，可全自动完成高质量实验，提高科室工作效率，增加科室检测项目，欢迎垂询试用。
DH-4800 Plus可一键完成烤片、脱片、脱蜡、抗原修复直至复染全过程。除常规的免疫组化实验，还支持原位杂交、细胞免疫化学染色，细胞双染以及组织双染等实验。标准的流程、精密的加样、稳定的环境，帮助实验室获得高质量的染色结果。
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